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鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺，保持恒低温无菌的环境，利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心，简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液，并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中，进行多次真空冷冻干燥，并经进一步处理获得含水率在3％以下的胶原蛋白微粉；较后由灭菌、无菌包装，成品胶原蛋白粉末的纯度在98％以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料，所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。重庆正规鼠尾胶原厂家直销

鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理，收集上清液；在冰水浴中，用的3〜6mol/l的nacl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°c沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀2.用0.03〜0.06mol/l的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节ph=6.5，用的3〜6mol/l的nacl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°c沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。厦门鼠尾胶原厂家推荐将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

鼠尾胶原蛋白的用途是什么：在工业应用方面，鼠尾胶原蛋白用于培养容器等实验室设备的内部涂层。设备上的胶原蛋白薄层通常被允许干燥。它还可以用来制造一种凝胶，可当作悬浮细胞的培养基。此外，还可以把它当胶水使用。在化妆品行业，鼠尾胶原蛋白可当作沐浴液和肥皂中的凝胶。它还用于生产能减少皱纹和改善皮肤质量的面霜或护肤霜。不过，用于抚纹，或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。不过，用于抚纹，或使嘴唇显得更大更饱满的注射用胶原蛋白通常是从牛或猪提取。

鼠尾胶原蛋白i型，用那一种胶原酶可以溶解：1．将胶原加入到0.1m的醋酸中，制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2．建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3．稀释一定数量的胶原溶液。4．按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5．从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的，这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液。

鼠尾胶原实验应用：鼠尾胶原在原代培养耳蜗血管纹边缘细胞中的应用。目的：建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。方法:制作鼠尾胶原,并观察利用自制的鼠尾胶原所培养出大鼠耳蜗边缘细胞的效果。结果：自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞，细胞角蛋白18表达阳性，免疫组织化学结果和扫描电镜证实所培养的细胞具有典型的分泌上皮细胞特征。结论：成功建立了利用自制鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法，并且制作简便,成本低廉。加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。武汉鼠尾胶原厂家现货

碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。重庆正规鼠尾胶原厂家直销

使用方法：1、细胞培养器皿的表面包被：以包被浓度为2μg/cm2为例，用无菌0.006mol/l乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后，用pbs洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备：a、无细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/ml三维胶1ml为例）将200μl本品加到置于冰浴的离心管中，加入690μl双蒸水，然后加到12μl0.1mol/lnaoh中（如果反过来把12μl0.1mol/lnaoh加到胶原溶液中，会由于naoh不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100μl10×pbs或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后ph为7左右，如果pbs或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定ph值）。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×pbs，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。重庆正规鼠尾胶原厂家直销

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